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【ISCO】RediSep® 反相 C18、C18Aq 和C8色譜柱使用、清潔及存儲(chǔ)指南
檢測(cè)樣品:有機(jī)溶劑
檢測(cè)項(xiàng)目:分離 純化
方案概述:本文介紹了ISCO RediSep®系列反相C18、C18Aq和C8色譜柱的使用、清潔及存儲(chǔ)方法。通過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理、清洗和存儲(chǔ),可以延長(zhǎng)色譜柱的壽命并提高其一致性和可靠性。文章還提供了具體的操作步驟和注意事項(xiàng),以確保色譜柱的最佳性能。
一、應(yīng)用概述
對(duì)可重復(fù)使用的Teledyne ISCO RediSep Silver反相C18和RediSep Gold®高性能C18、C18Aq及C8色譜柱進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理、清洗和儲(chǔ)存,有助于延長(zhǎng)柱子壽命并提高其一致性和可靠性。
二、通用方法
初始預(yù)處理
在使用前,用六倍柱體積(CV)的1:1水:乙腈沖洗柱子。或者,通過柱子泵入兩倍柱體積的100%乙腈,然后蓋上蓋子存放一小時(shí)后再使用。有關(guān)柱體積數(shù)據(jù),請(qǐng)參見表1。
表1:色譜柱數(shù)據(jù)
樣品負(fù)載能力
色譜柱上的樣品負(fù)載應(yīng)為柱介質(zhì)重量的0.1%到2%。
運(yùn)行后維護(hù)
在適當(dāng)?shù)木S護(hù)下,RediSep C18色譜柱可以使用三十次或更多。反相方法應(yīng)該編寫成在分離結(jié)束時(shí),用2-4倍柱體積(CV)的高比例(100%)有機(jī)溶劑(B溶劑)沖洗柱子。經(jīng)過2-4 CV的沖洗后,可以將有機(jī)溶劑的比例恢復(fù)到初始條件并沖洗2-3 CV,以準(zhǔn)備下一次運(yùn)行的柱子平衡條件(見圖1)?;蛘?,可以將有機(jī)溶劑的比例改為80%,以便為色譜柱存儲(chǔ)做準(zhǔn)備。
圖1. 運(yùn)行后色譜柱沖洗
三、存儲(chǔ)
C18色譜柱可以長(zhǎng)時(shí)間存儲(chǔ)而不會(huì)損失性能。以下是反相C18色譜柱存儲(chǔ)的一些通用規(guī)則:
• 一旦潤(rùn)濕后,切勿讓反相色譜柱干燥。這將由于固定相的膨脹和收縮而導(dǎo)致通道效應(yīng)。如果Flash色譜系統(tǒng)上有空氣吹掃功能,應(yīng)關(guān)閉該功能。
• 將色譜柱濕潤(rùn)并蓋好,存儲(chǔ)在含有10-30%水和70-90%有機(jī)溶劑(如乙腈、甲醇或乙醇)的環(huán)境中。
四、總結(jié)
在使用前預(yù)處理色譜柱。用高比例(100%)有機(jī)溶劑清潔色譜柱。切勿讓色譜柱干燥,并以70-90%有機(jī)溶劑濕潤(rùn)和蓋好存儲(chǔ)。
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